下游純化中經(jīng)常由于樣品中的雜質(zhì)較多包含低分子量的聚合物、片段、電荷異質(zhì)體、鹽析物等,導(dǎo)致上樣電導(dǎo)值較高的情況出現(xiàn),此時(shí)選擇層析介質(zhì)一般優(yōu)先考慮有強(qiáng)離子交換能力的配基。賽分科技推薦強(qiáng)陽離子交換填料Proteomix POR50-XS,高分辨率、高耐鹽的優(yōu)勢使其能夠在高電導(dǎo)條件下有效地分離目標(biāo)樣品,同時(shí)保持足夠的載量和回收率。
產(chǎn)品介紹
Proteomix POR50-XS強(qiáng)陽離子交換填料以親水化改性聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)為基質(zhì),粒徑為50 μm,粒徑均一,具有良好的物理化學(xué)穩(wěn)定性。填料表面經(jīng)賽分科技特殊處理,具有更好的親水性,最大程度地避免了與生物類樣品的非特異性吸附。在上樣電導(dǎo)較高(6~10 mS/cm),樣品中雜質(zhì)(片段、聚集體、電荷異質(zhì)體等)含量較高的情況下,Proteomix POR50-XS仍能保持較好的分離效果,適用于抗體、重組蛋白等生物樣品的下游純化。
圖1. Proteomix POR50-XS填料結(jié)構(gòu)示意圖
填料特點(diǎn)
1.具有一定的耐鹽性能
2.剛性基質(zhì)可耐受高壓和高流速
3.高分辨率、高柱效和高回收率
4.高批間重現(xiàn)性、易于放大
技術(shù)參數(shù)
性能測試
1. 耐壓測試
對Proteomix POR50-XS填料進(jìn)行壓力測試,測試填料在幾種常見溶劑中隨流速不斷增加的壓力變化。由圖2可以看出,Proteomix POR50-XS填料在常用溶劑的壓力表現(xiàn)為:20%乙醇 > 純水 > 1 M NaCl> 100 mM NaCl;并且在不同的流動(dòng)相體系中,每一級流速對應(yīng)的壓力都非常穩(wěn)定。Column: Proteomix POR50-XS (100 x 200 mm)
圖2. Proteomix POR50-XS壓力-流速曲線
2. 耐堿測試將Proteomix POR50-XS在1.0 M NaOH 室溫下浸泡7天,檢測其載量變化。如圖3展示,載量都在80 mg/mL及以上,Proteomix POR50-XS耐堿性能優(yōu)良穩(wěn)定。
圖3. Proteomix POR50-XS耐堿測試數(shù)據(jù)
應(yīng)用案例
某雙特異性抗體樣品純化實(shí)驗(yàn)方案
層析柱信息:Proteomix POR50-XS(6.6*180 mm,CV=6.158 mL)
檢 測 器:UV 280 nm
樣 品:某雙抗樣品
上 樣 量:60 mg/mL填料
上 樣 條 件:電導(dǎo) 6.0 mS/cm,pH5.5
圖4. Proteomix POR50-XS與填料B的純化圖譜
從純化圖譜和純化后數(shù)據(jù)可知,Proteomix POR50-XS與進(jìn)口填料B的純化表現(xiàn)相當(dāng),樣品純度和回收率數(shù)據(jù)相近且Proteomix POR50-XS純度略高于進(jìn)口填料B。
表1. Proteomix POR50-XS與填料B的純化結(jié)果對比
訂購信息
注:包裝規(guī)格為1L,5 L, 10 L, 50 L,預(yù)裝柱規(guī)格為1mL, 4.2mL, 5 mL