近期,可口可樂公司在橙汁中發(fā)現(xiàn)未經(jīng)許可的殺菌劑,并向美國食品與藥物管理局(FDA)報(bào)告。此次檢出殺菌劑多菌靈的橙汁,原料橙來自巴西,當(dāng)?shù)囟嗑`多用于殺滅霉菌,但實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),該物質(zhì)有導(dǎo)致動(dòng)物肝癌病變的高風(fēng)險(xiǎn)。這一事件引發(fā)了外界對(duì)中國橙汁飲料食品安全的擔(dān)憂。中國是巴西橙汁第四大進(jìn)口國,據(jù)悉,中國市場(chǎng)現(xiàn)售的熟知品牌橙汁,不同程度地兌入了巴西橙汁。
目前,國內(nèi)對(duì)于果汁中多菌靈的檢測(cè)主要依據(jù)SN/T 1753-2006《進(jìn)出口濃縮果汁中噻菌靈、多菌靈殘留檢測(cè)方法高效液相色譜法》,賽分科技日前建立了采用QuEChERS和LC/MS/MS檢測(cè)橙汁中多菌靈的方法,不僅操作上更加快速簡(jiǎn)單,而且大大提高了目標(biāo)物質(zhì)的檢出限(多菌靈檢測(cè)限達(dá)到ppb級(jí))。
采用QuEChERS和LC/MS/MS方法檢測(cè)橙汁中的多菌靈
產(chǎn)品描述
ECQUEU750CT-MP | 50 mL離心管,每袋包含4 g MgSO4,1g NaCl,500 mg 檸檬酸二鈉和1 g 檸檬酸三鈉 |
CUMPSC18CT | 2mL微離心管裝有150 mg無水硫酸鎂、50 mg PSA、50 mg封尾C18 |
一、樣品前處理
1. 向50mL離心管中加入10 mL橙汁,渦流混均、平衡15 min。
2.加入10 mL乙腈混合。加入鹽包 (ECQUEU750CT-MP),劇烈振蕩1min,然后在20 ºC,5000 rpm轉(zhuǎn)速下離心5 min。下面是經(jīng)過QuEChERS提取后的樣品圖片,上層是乙腈提取液。3.移取1 mL提取液至裝有150 mg無水硫酸鎂、50 mg PSA、50 mg封尾C18的2 mL微離心管中(CUMPSC18CT)
4. 振搖1 min后在10000 rpm轉(zhuǎn)速下離心5 min。移取 0.5 mL提取液至2 mL自動(dòng)進(jìn)樣瓶。加入25 μL 1 ppm 三苯基磷酸酯(TPP),然后進(jìn)行LC/MS/MS分析。
二、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件
色譜柱: Sepax HP-C18, 2.1 x 100 mm, 3 μm, 120 Å
柱溫: 室溫
進(jìn)樣體積: 10 μL (15 ºC)
流動(dòng)相: A: 0.1% 甲酸溶液;B:含 0.1% 甲酸的甲醇溶液
流速: 200 μL/min
流動(dòng)相梯度程序 | ||
時(shí)間(min) | %A | %B |
0 | 50 | 50 |
3 | 0 | 100 |
8 | 0 | 100 |
9 | 50 | 50 |
14 | 50 | 0 |
電離模式: 電噴霧離子源(ESI)
離子極化方式:正離子 ESI
電噴霧電壓: 3000 V
霧化氣壓力 (N2): 40 psi
輔助氣(N2)壓力: 10 psi
離子傳輸毛細(xì)管溫度: 350 °C
掃描方式: 選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)(SRM, 0-10 min)
碰撞誘導(dǎo)裂解(CID)條件: 1.5 mTorr 氬氣
SRM模式下監(jiān)測(cè)的躍遷過程如下:
化合物 | 母離子 | 子離子1 | 碰撞能量(CE) | 子離子2 | 碰撞能量(CE) | S-Lens | 駐留時(shí)間(s) |
多菌靈 | 92.093 | 132.080 | 29 | 160.080 | 17 | 81 | 0.2 |
TPP(內(nèi)標(biāo)) | 327.093 | 77.020 | 37 | 152.070 | 33 | 98 | 0.10 |
三、數(shù)據(jù)分析及實(shí)驗(yàn)結(jié)果
多菌靈的基質(zhì)匹配校準(zhǔn)曲線:
線性范圍是2-500 ng/mL,R2 =0.9992。檢出限(LOD)和定量限(LOQ)分別是0.4 和1.4 ng/mL。
多菌靈的準(zhǔn)確度和精密度數(shù)據(jù)
加標(biāo)濃度(ng/mL) | 回收率(%) | RSD%(n=4) |
10 | 96.6 | 4.5 |
50 | 100.2 | 3.4 |
250 | 103.7 | 2.1 |
按照優(yōu)化的方法,對(duì)三家知名品牌的橙汁進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果見下表:
樣品 | 樣品描述 | 檢測(cè)到的多菌靈含量 |
樣品1 | 100% 鮮橙汁-品牌A | < 1.4 ng/mL |
樣品2 | 橙汁-品牌B | < 1.4 ng/mL |
樣品3 | 含果粒的橙汁-品牌B | 5.3 ng/mL |
樣品4 | 純果樂(低酸)-品牌C | < 1.4 ng/mL |
樣品5 | 橙汁-品牌B | < 1.4 ng/mL |
樣品6 | 純果樂(含一些果粒)-品牌C | < 1.4 ng/mL |
這六種橙汁樣品每種平行測(cè)定3次。僅在樣品3(含果粒的橙汁-品牌B)中檢出多菌靈,含量為5.3 ng/mL,遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于歐盟規(guī)定的最大允許量 200 ppb。圖1為空白樣品3(a)和加標(biāo)樣品3 (50 ng/mL)中多菌靈的色譜圖。