Monomix MC-NTA IMAC填料是一種金屬親和層析填料,適用于純化組氨酸(His)標(biāo)簽的重組蛋白,這類重組蛋白廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。該填料以親水性聚甲基丙烯酸酯微球為基質(zhì),粒徑為60 μm,孔徑為1000 Å,具有較高的物理和化學(xué)穩(wěn)定性。填料表面具有高度親水性,最大程度地避免了與生物類樣品的非特異性吸附。在親水性表面,以專有連接物鏈接了能螯合多價金屬離子的羧酸基團。
Monomix MC-NTA IMAC填料有兩種類型:游離酸型 (Monomix MC-NTA CA)和螯合鎳離子型 (Monomix MC-NTA Ni)。游離酸型可用于金屬離子去除,也可根據(jù)客戶要求定制其他金屬離子型填料。這兩種類型的IMAC填料結(jié)構(gòu)如下圖所示。Monomix MC-NTA IMAC填料可重復(fù)使用。
Monomix MC60-NTA Ni
Monomix MC60-NTA CA
建議使用純水或NaCl溶液裝柱;常用線性流速下,Monomix MC60-NTA Ni填料背壓低
該填料化學(xué)穩(wěn)定高,可耐受0.1-0.5 M NaOH溶液清洗循環(huán)。該填料不耐EDTA及DTT。使用一段時間后需重新補充金屬離子。
填料類型 |
Monomix MC60-NTA Ni
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Monomix MC60-NTA CA
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基質(zhì) |
親水性聚甲基丙烯酸酯
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粒徑 |
60 µm
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孔徑 |
1000 Å
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組氨酸標(biāo)記蛋白(His-protein) 載量/離子交換當(dāng)量 |
≥35 mg/mL 填料
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>100 μeq./mL(羧酸含量)
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最大線性流速 |
≤1800 cm/h
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操作溫度 |
≤40°C
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pH適用范圍 |
1-13
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操作壓力 |
≤1 MPa(10 bar)
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流動相兼容性 |
水溶液,或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物。常用緩沖液:磷酸鹽、三羥甲基氨基甲烷(Tris)和醋酸鹽,也與6 M鹽酸胍、8 M尿素相容
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期保存方法 |
50% (v/v) ,保存于20%乙醇中
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再生 | EDTA脫去Ni 離子后,用0.1-0.5 M的NaOH 溶液清洗干凈,重新補充Ni 離子 | EDTA脫去金屬離子,用0.1-0.5 M的NaOH 溶液清洗干 |
清洗 |
0.1 M NaOH清洗
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上樣:樣品泵進樣30mg/mL,柱留時間5min,UV280nm信號值20mAU-20mAU收集。5min駐留時間。
淋洗:使用50mM PB,1M NaCl,pH8.0沖洗層析柱5CV,UV280nm信號值20mAU-20mAU收集。5min駐留時間。
再平衡:使用平衡液50mM PB,200mM NaCl,pH8.0再平衡層析柱3CV,5min駐留時間。
洗脫:使用洗脫液( 50mM PB,200mM NaCl,500mM 咪唑,pH8.0)洗脫,8CV,5min駐留時間。UV280nm信號值20mAU-20mAU收集。
Column: Zenix SEC-300 (3μm, 300 Å, 4.6×300 mm)
Mobile phase: 150mM PB,pH 7.0
Flow rate: 1mL/min
Detector: UV 280 nm
Column temperature: 25 ℃
產(chǎn)品名稱 | 粒徑(µm) | 訂貨號 |
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Monomix MC60-NTA CA | 60 | 285560950 |
Monomix MC60-NTA Ni | 60 | 285460950 |