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    • 賽分科技疏水填料高的機(jī)械穩(wěn)定性保證了填料的耐壓性能,在工業(yè)純化工藝開發(fā)中可以滿足高流速和減少操作時(shí)間的要求。高的化學(xué)穩(wěn)定性保證填料能耐受 pH 14 的清洗操作。這些優(yōu)異的填料性能使其滿足從實(shí)驗(yàn)室工藝開發(fā)、工藝放大到完成生產(chǎn)等各階段的分離純化需求。

      疏水 ( HIC ) 填料可應(yīng)用于捕獲、中度純化、精細(xì)純化等蛋白純化的各個(gè)階段。賽分科技可提供三種類型的HIC 產(chǎn) 品:Monomix MC-HIC、 Generik MC-HIC 和Polar MC-HIC。 這三種填料的基質(zhì)均為聚甲基丙烯酸酯,Generik MC-HIC 比 Polar MC-HIC 疏 水 性 更 強(qiáng),而Monomix MC- HIC 相比其他兩種填料孔徑更大,更適用于分子量較大的蛋白。

      三 種 HIC 填 料 粒 徑 為 30 和 60 μm,其 中MonomixMC-HIC 粒 徑 更 均 一。Generik MC-HIC 及Polar MC-HIC 填 料 為 多 分 散 型,Monomix MC-HIC 填料為單分散型。

      三種 HIC 填料都具有良好的物理化學(xué)穩(wěn)定性,表面經(jīng)賽分科技特殊處理,具有更好的親水性,最大程度地避免了與生物類樣品的非特異性吸附。

      賽分科技疏水層析填料表面覆蓋了一層親水性的納米涂層,再通過(guò)化學(xué)修飾鍵合上不同官能團(tuán):Buty(丁基)、Ether(乙醚基)和芳香基(如苯基)。不同的基團(tuán)提供不同的疏水性能,疏水性由弱至強(qiáng)為Ether、Butyl、 Phenyl。

    技術(shù)參數(shù)

    表1. Monomix MC-HIC技術(shù)參數(shù)

    填料類型 Monomix MC-HIC Butyl Monomix MC-HIC Phenyl Monomix MC-HIC Phenyl Hsub
    親水性聚甲基丙烯酸酯 聚甲基丙烯酸酯
    粒徑大小 30 μm 60 μm 30 μm 60 μm 60 μm
    動(dòng)態(tài)載量*(mg溶菌酶/mL填料) >40 >20 >45 >30 >20
    pH適用范圍 2-13
    最高操作溫度 40℃
    最大操作壓力 1 MPa (10 bar)
    流動(dòng)相兼容性 一般水溶液兼容,也可兼容于水和乙腈、丙酮或甲醇的混合液。
    常用緩沖液體系:Tris、磷酸鹽、醋酸鹽緩沖液等
    最大線性流速 1800 cm/h
    保存 50%(v/v)勻漿保存于20%乙醇中

    表2. Polar MC-HIC技術(shù)參數(shù)/Generik MC-HIC技術(shù)參數(shù)

    填料類型 Polar MC-HIC Ether Polar MC-HIC Butyl
    Generik MC-HIC Butyl
    Polar MC-HIC Phenyl
    Generik MC-HIC Phenyl
    基質(zhì) 親水性聚甲基丙烯酸酯 親水性聚甲基丙烯酸酯 親水性聚甲基丙烯酸酯
    粒徑大小 30 μm 60 μm 30 μm 60 μm 30 μm 60 μm
    動(dòng)態(tài)載量*(mg溶菌酶/mL填料) >15 >13 >40 >30 >45 >40
    pH適用范圍 2-13 2-13 2-13
    最高操作溫度 40℃ 40℃ 40℃
    最大操作壓力 3 MPa (30 bar) 3 MPa (30 bar) 3 MPa (30 bar)
    流動(dòng)相兼容性 一般水溶液兼容,也可兼容于水和乙腈、丙酮或甲醇的混合液。
    常用緩沖液體系:Tris、磷酸鹽、醋酸鹽緩沖液等
    最大線性流速 1800 cm/h
    保存 50%(v/v)勻漿保存于20%乙醇中

      *DBC測(cè)試方法: 1 mg/mL溶菌酶溶于25 mM磷酸鹽緩沖液(pH 7) + 2 M(NH?)?SO?,線性流速360 cm/h ,檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm ,載量以10%流穿計(jì)。

    圖 1. 疏水層析填料疏水性強(qiáng)弱分布圖

    圖片.png

    更快的操作流速

      相比于傳統(tǒng)的瓊脂糖基質(zhì),采用聚甲基丙烯酸酯基質(zhì)可以提高填料的耐壓性能,能夠在更快的流速下實(shí)現(xiàn)樣品純化(或者可以裝更長(zhǎng)的柱子,可以批次處理更多的生物樣品),節(jié)省寶貴時(shí)間,提高生產(chǎn)效率。對(duì)于不穩(wěn)定的生物樣品(要求快速分離純化母液),在提高生產(chǎn)效率的同 時(shí)可以提高產(chǎn)品的回收率和質(zhì)量控制。

    圖2. 兩種HIC填料壓力相對(duì)流速曲線

    2.png

    不同HIC填料的選擇性比較

    圖3. 不同HIC填料的分析性能比較

    4.jpg

      樣品:核糖核酸酶A、溶菌酶、胰凝乳蛋白酶原(2 mg/mL)

    不同官能團(tuán)的選擇性比較

    圖4. Monomix MC-HIC不同官能團(tuán)填料的分析性能比較

    2.png

      樣品:核糖核酸酶A、溶菌酶、胰凝乳蛋白酶原(2 mg/mL)

    應(yīng)用圖譜

    產(chǎn)品名稱 粒徑 訂貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 粒徑 訂貨號(hào)
    Monomix MC30-HIC Butyl 30 μm 281630950 Polar MC60-HIC Phenyl 60 μm 191360800
    Monomix MC30-HIC Phenyl 30 μm 281930950 Polar MC30-HIC Ether 30 μm 191130800
    Monomix MC60-HIC Butyl 60 μm 281660950 Polar MC30-HIC Butyl 30 μm 191030800
    Monomix MC60-HIC Phenyl 60 μm 281960950 Polar MC30-HIC Phenyl 30 μm 191330800
    Monomix MC60-HIC Phenyl Hsub 60 μm 285760950 Generik MC30-HIC Butyl 30 μm 181430800
    Polar MC60-HIC Ether 60 μm 191160800 Generik MC60-HIC Butyl 60 μm 181460800
    Polar MC60-HIC Butyl 60 μm 191060800 Generik MC60-HIC Phenyl 60 μm 181660800

    預(yù)裝柱規(guī)格為1、4.2 、5 mL,包裝規(guī)格為5 L以下及1L、5L、10L、50L。

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