Proteomix離子交換樹脂采用了賽分公司獨(dú)創(chuàng)的合成技術(shù),所得到的無孔樹脂具有高的離子交換容量。填料為剛性、球形、高交聯(lián)度的聚苯乙烯/二乙烯苯(PS/DVB)顆粒。無孔填料的粒徑有1、1.8、3、5和10 μm等幾種規(guī)格。PS/DVB樹脂表面鍵合有一層高度親水的納米厚度的中性聚合物薄膜。疏水的PS/DVB樹脂表面完全被這種親水材料覆蓋,從而消除了PS/DVB對生物分子的不可逆吸附,保證了其具有很高的分離效率和生物樣品回收率。運(yùn)用賽分獨(dú)有的化學(xué)鍵合技術(shù),可將離子交換官能基團(tuán)致密均勻地鍵合在親水層的表面,獲得高容量的離子交換層。無孔Proteomix離子交換樹脂的獨(dú)特之處在于它綜合了高容量和無孔樹脂所固有的高分離效率兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)。Proteomix離子交換樹脂可用于蛋白、寡核苷酸、多肽、聚多糖、細(xì)胞溶解液、納米顆粒和納米管等的分離。
Proteomix SCX、WCX、SAX和WAX填料的化學(xué)組成
離子交換固定相有強(qiáng)陽離子交換(SCX)、弱陽離子交換(WCX)、強(qiáng)陰離子交換(SAX)、弱陰離子交換(WAX)四種。Proteomix SCX、WCX、SAX、WAX相分別是將磺酸基、羧基、季銨基和叔胺基化學(xué)鍵合在無孔PS/DVB樹脂親水涂層表面而形成的。
固定相 | 孔徑 | 粒徑 (µm) | 動態(tài)載量 | 適用pH范圍 |
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Proteomix SCX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10 | Non-porous | 1.7, 3, 5, 10 | ~60, 54, 38, and 20 mg/mL | 2-12 |
Proteomix WCX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10 | Non-porous | 1.7, 3, 5, 10 | ~25, 19, 15 and 10 mg/mL | 2-12 |
Proteomix SAX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10 | Non-porous | 1.7, 3, 5, 10 | ~43, 35, 28, and 17 mg/mL | 2-12 |
Proteomix WAX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10 | Non-porous | 1.7, 3, 5, 10 | ~35, 26, 18, and 12 mg/mL | 2-12 |
眾所周知,無孔樹脂具有最大傳質(zhì)和最小橫向擴(kuò)散的優(yōu)點(diǎn),因此可使樣品得到快速、高效的分離。但是,由于無孔樹脂的比表面積低,這就導(dǎo)致了它的分離容量不高,從而限制了其在實(shí)踐中的許多應(yīng)用。賽分科技所開發(fā)的合成技術(shù)使Proteomix離子交換樹脂在提高無孔樹脂交換容量方面取得了創(chuàng)新性突破。該技術(shù)可以使無孔樹脂的吸附容量達(dá)到與有孔樹脂相當(dāng)?shù)乃健膱D1中可以看到,3 µm粒徑的Proteomix SAX和WAX無孔離子交換樹脂的動態(tài)吸附載量分別為35和26 mg/mL。圖2顯示3 µm粒徑的Proteomix SCX無孔樹脂的動態(tài)吸附載量可高達(dá)53.5 mg/mL。
流動相: 10 mM Tris/HCl, pH 8.0
流速: 0.25 mL/min
檢測波長: 280 nm
樣品: 3 mg/mL BSA
流動相: 10 mM Tris/HCl, pH 8.0
流速: 0.25 mL/min
檢測波長: 280 nm
樣品: 3 mg/mL溶菌酶
流動相: A, 20 mM PBS; B, A+1.0 M NaCl
梯度: 0-70% B (21 min)
流速: 0.35 mL/min
壓力: 2,800 psi
檢測波長: 280 nm
這種高吸附容量的離子交換樹脂可在高樣品負(fù)載量的情況下依然還具有高分離效率和高分辨率的特點(diǎn)。從圖6中可以看到,采用1.8µm粒徑的Proteomix SCX 無孔樹脂,當(dāng)樣品負(fù)載量高達(dá)200µg時(shí)色譜柱對細(xì)胞色素C仍具有滿意的分離效果。
Proteomix無孔樹脂具有三個(gè)特點(diǎn)。首先,納米厚度的親水層完全消除了PS/DVB與生物樣品之間的非特異性相互作用。其次,無孔顆粒結(jié)構(gòu)使樣品的橫向擴(kuò)散達(dá)到最小并阻止了其向填料顆粒內(nèi)部的擴(kuò)散。第三,賽分公司的專有技術(shù)可以合成均勻致密的離子交換層。經(jīng)過獨(dú)具匠心設(shè)計(jì)的Proteomix SCX-NP、WCX-NP、SAX-NP和WAX-NP樹脂可為蛋白質(zhì)、寡核苷酸、糖類和多肽等提供最好的分辨率和分離效率。圖7是4.6mm I.D.?50mm Proteomix SCX-NP3 (3µm)短柱對三種蛋白混合物(核糖核酸酶A、細(xì)胞色素C和溶菌酶)的分離圖譜。溶菌酶在5cm長的柱子上分離效率達(dá)到了100,000理論塔板數(shù),這樣的分離效果是前所未有的。
獨(dú)特的Proteomix離子交換色譜柱對蛋白分離具有最高的選擇性。如上圖所示,溶菌酶的6個(gè)色譜峰在4.6 mm I.D.´50 mm Proteomix SCX-NP3 (3 µm)短柱上得到了很好的分離。如此高的選擇性遠(yuǎn)優(yōu)于其他公司同類產(chǎn)品。
左圖是5 µm粒徑的Proteomix SAX-NP柱對卵清蛋白和BSA混合物的分離結(jié)果。從圖中可以明顯看到卵清蛋白及其雜質(zhì)和BSA及其二聚體的分離。
填料粒徑越小,分離效率越高,分離速度越快。 Proteomix離子交換樹脂的粒徑具有多種規(guī)格,粒徑從1.0 µm到10 µm不等,可用于分析和半制備等不同用途。用1.7、3、5和10 µm四不同粒徑的弱陽離子交換樹脂對三種蛋白分離得到的譜圖如圖7。從圖中可以看到,粒徑越小,分離效率和分辨率就越高。例如溶菌酶中一個(gè)標(biāo)號為N的雜質(zhì),在用10 µm粒徑的WCX柱基本不能得到分離。在用5 µm粒徑的WCX柱上則基本達(dá)到基線分離。當(dāng)粒徑減小到3 µm時(shí),可以獲得基線分離。而當(dāng)粒徑進(jìn)一步降低到1.7 µm時(shí)雜質(zhì)可得到完全分離。
流動相: A, 20 mM PBS; B, A+1.0 M NaCl
梯度: 0-100% B (20 min)
流速: 蛋白濃度(1.0 mg/mL) (1) 核糖核酸酶A (2) 細(xì)胞色素C (3) 溶菌酶
檢測波長: UV 280 nm
賽分科技的Proteomix離子交換柱具有極高的批間重現(xiàn)性,這得益于受到嚴(yán)格監(jiān)控的聚合物樹脂生產(chǎn)及表面化學(xué)修飾工藝。不同批次間的保留時(shí)間誤差在6%以內(nèi)。圖8是對三批3 µm粒徑的Proteomix SAX-NP柱分析結(jié)果的比較。
測試條件: SAX-NP3 柱(3 µm, 4.6 mm I.D.×50 mm); 20 mM Tris, pH 8.0, 0-0.3 M NaCl (15 min)
流速: 0.5 mL/min
檢測波長: 214 nm
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格屬性 | 貨號 | 柱體積(ml) |
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Proteomix SCX | 5um 21.2*50mm NP | 401NP5-21205 | 17.6 |
Proteomix SCX | 5um 21.2*10mm NP | 401NP5-21210 | 35.2 |
Proteomix SCX | 5um 21.2*250mm NP | 401NP5-21225 | 88 |
Proteomix SCX | 5um 21.2*300mm NP | 401NP5-21230 | 105 |
Proteomix SCX | 5um 30*150mm NP | 401NP5-30015 | 105.9 |
Proteomix SCX | 5um 30*250mm NP | 401NP5-30025 | 176 |
Proteomix SCX | 5um 30*300mm NP | 401NP5-30030 | 211.9 |
Proteomix SCX | 5um 50*150mm NP | 401NP5-50015 | 294 |
Proteomix SCX | 5um 50*250mm NP | 401NP5-50025 | 490 |
Proteomix SCX | 5um 50*300mm NP | 401NP5-50030 | 588 |
產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
---|---|---|---|---|
Proteomix SCX-NP | 3 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 401NP3-4001 |
Proteomix SCX-NP | 3 μm | NP | 4.6x50mm | 401NP3-4605 |
Proteomix SCX-NP | 3 μm | NP | 4.6x100mm | 401NP3-4610 |
Proteomix SCX-NP | 3 μm | NP | 4.6x150mm | 401NP3-4615 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 401NP5-4001 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x50mm | 401NP5-4605 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x100mm | 401NP5-4610 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x150mm | 401NP5-4615 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x250mm | 401NP5-4625 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 7.8x100mm | 401NP5-7810 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 7.8x250mm | 401NP5-7825 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 10.0x250mm | 401NP5-10025 |
Proteomix SCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x250mm(PEEK柱管) | 401NP5P-4625 |
Proteomix SCX-NP | 10 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 401NP10-4001 |
Proteomix SCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x50mm | 401NP10-4605 |
Proteomix SCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x100mm | 401NP10-4610 |
Proteomix SCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x150mm | 401NP10-4615 |
Proteomix SCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x250mm | 401NP10-4625 |
Proteomix SCX-NP | 10 μm | NP | 7.8x150mm | 401NP10-7815 |
Proteomix SCX-NP | 10 μm | NP | 7.8x250mm | 401NP10-7825 |
產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
---|---|---|---|---|
Proteomix WCX-NP | 3 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 402NP3-4001 |
Proteomix WCX-NP | 3 μm | NP | 4.6x50mm | 402NP3-4605 |
Proteomix WCX-NP | 3 μm | NP | 4.6x100mm | 402NP3-4610 |
Proteomix WCX-NP | 3 μm | NP | 4.6x150mm | 402NP3-4615 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 402NP5-4001 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x50mm | 402NP5-4605 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x100mm | 402NP5-4610 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x150mm | 402NP5-4615 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 4.6x250mm | 402NP5-4625 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 7.8x100mm | 402NP5-7810 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 7.8x250mm | 402NP5-7825 |
Proteomix WCX-NP | 5 μm | NP | 10.0x250mm | 402NP5-10025 |
Proteomix WCX-NP | 10 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 402NP10-4001 |
Proteomix WCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x50mm | 402NP10-4605 |
Proteomix WCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x100mm | 402NP10-4610 |
Proteomix WCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x150mm | 402NP10-4615 |
Proteomix WCX-NP | 10 μm | NP | 4.6x250mm | 402NP10-4625 |
Proteomix WCX-NP | 10 μm | NP | 7.8x150mm | 402NP10-7815 |
Proteomix WCX-NP | 10 μm | NP | 7.8x250mm | 402NP10-7825 |
產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
---|---|---|---|---|
Proteomix SAX-NP | 3 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 403NP3-4001 |
Proteomix SAX-NP | 3 μm | NP | 4.6x50mm | 403NP3-4605 |
Proteomix SAX-NP | 3 μm | NP | 4.6x100mm | 403NP3-4610 |
Proteomix SAX-NP | 3 μm | NP | 4.6x150mm | 403NP3-4615 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 403NP5-4001 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x50mm | 403NP5-4605 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x100mm | 403NP5-4610 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x150mm | 403NP5-4615 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x250mm | 403NP5-4625 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 7.8x100mm | 403NP5-7810 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 7.8x250mm | 403NP5-7825 |
Proteomix SAX-NP | 5 μm | NP | 10.0x250mm | 403NP5-10025 |
Proteomix SAX-NP | 10 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 403NP10-4001 |
Proteomix SAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x50mm | 403NP10-4605 |
Proteomix SAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x100mm | 403NP10-4610 |
Proteomix SAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x150mm | 403NP10-4615 |
Proteomix SAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x250mm | 403NP10-4625 |
Proteomix SAX-NP | 10 μm | NP | 7.8x150mm | 403NP10-7815 |
Proteomix SAX-NP | 10 μm | NP | 7.8x250mm | 403NP10-7825 |
產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
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Proteomix WAX-NP | 3 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 404NP3-4001 |
Proteomix WAX-NP | 3 μm | NP | 4.6x50mm | 404NP3-4605 |
Proteomix WAX-NP | 3 μm | NP | 4.6x100mm | 404NP3-4610 |
Proteomix WAX-NP | 3 μm | NP | 4.6x150mm | 404NP3-4615 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 404NP5-4001 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x50mm | 404NP5-4605 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x100mm | 404NP5-4610 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x150mm | 404NP5-4615 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 4.6x250mm | 404NP5-4625 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 7.8x100mm | 404NP5-7810 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 7.8x250mm | 404NP5-7825 |
Proteomix WAX-NP | 5 μm | NP | 10.0x250mm | 404NP5-10025 |
Proteomix WAX-NP | 10 μm | NP | 4.0x10mm(保護(hù)柱) | 404NP10-4001 |
Proteomix WAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x50mm | 404NP10-4605 |
Proteomix WAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x100mm | 404NP10-4610 |
Proteomix WAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x150mm | 404NP10-4615 |
Proteomix WAX-NP | 10 μm | NP | 4.6x250mm | 404NP10-4625 |
Proteomix WAX-NP | 10 μm | NP | 7.8x150mm | 404NP10-7815 |
Proteomix WAX-NP | 10 μm | NP | 7.8x250mm | 404NP10-7825 |