瘦肉精是一類(lèi)動(dòng)物用藥,有數(shù)種藥物被稱(chēng)為瘦肉精,例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等。
目前,檢測(cè)瘦肉精的方法主要有四種,即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)、毛細(xì)管區(qū)帶電泳法(CE)和免疫分析技術(shù)(IA)。而我國(guó)結(jié)合自己的實(shí)際情況,2001年農(nóng)業(yè)部首先組織制定了飼料中鹽酸克倫特羅的測(cè)定標(biāo)淮。該標(biāo)準(zhǔn)選擇確定了兩種:即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)。而HPLC法作為檢測(cè)瘦肉精的半確證性方法,其最低檢測(cè)限為0.05μg/ kg,具有檢測(cè)精確度高,假陽(yáng)性率低的有點(diǎn),被廣泛使用。
賽分科技結(jié)合自身在液相色譜領(lǐng)域深厚的技術(shù)基礎(chǔ),及相關(guān)完善的產(chǎn)品線,推出瘦肉精的完整解決方案。
動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅和萊克多巴胺殘留量的檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)材料
固相萃取柱:SSDBX, 60 mg/3 mL (SSDBX063)
分析物:鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺
1.提取
稱(chēng)取(5±0.05)g 動(dòng)物肝組織樣品于帶蓋的聚四氟乙烯離心管中,加入15 mL乙酸乙酯,再加入3 mL 10.0%碳酸鈉溶液,以10 000 r/min以上的速度勻質(zhì)60 s,蓋上蓋子以 5000 r/min 的速度離心2 min,吸取上層有機(jī)溶劑于離心管中,在 殘?jiān)性偌尤?/span>10 mL 乙酸乙酯在漩渦混合器上混合1 min。離心后吸取有機(jī)溶劑并合并提取液。在收集的有機(jī)溶劑中加入5 mL 0.10 mol/mL 的鹽酸溶液,漩渦混合 30 s,以5000 r/min 的速度離心2 min,吸取下層溶液,同樣步驟重復(fù)萃取一次,合并兩次萃取液,用 2.5 mol/L NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH 至5.2。
2.凈化
活化:依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水和5 mL 30 mmol/L 鹽酸潤(rùn)洗固相萃取柱
上樣:將提取液加入柱中,棄去流出液
淋洗:依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗,淋洗液棄去,并將小柱抽干
洗脫:6 mL 4% 氨化甲醇洗脫,收集洗脫液。
3 測(cè)定
4 HPLC分析
色譜柱:Sapphire C18, 5 µm, 100 Å, 4.6×250 mm
流動(dòng)相:10 mM KH2PO4(pH 3.0) : ACN = 70:30 (v/v)
流速:1.0 mL/min;溫度:室溫;檢測(cè)器:UV 220 nm;進(jìn)樣體積:20 µL
1.萊克多巴胺 2. 克倫特羅